中文名称：牛病毒性腹泻病毒抗体(p80)竞争 ELISA 检测试剂盒

英文名称：Bovine Viral Diarrhea virus (p80) Competitive ELISA antibody test kit

作用与用途

通过检测牛血清样品中的牛病毒性腹泻病毒抗体水平。

试剂盒组成

组成成份1*96T2*96T5*96T

抗原包被板1  块（96 孔/块）2  块（96 孔/块）5  块（96 孔/块）

酶标抗体1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）1  瓶（60ml/瓶）

20X 洗涤液1  瓶（30ml/瓶）1  瓶（60ml/瓶）2  瓶（60ml/瓶）

阳性对照1  管（0. 1ml/管）1  管（0.2ml/管）1  管（0.5ml/管）

阴性对照1  管（0. 1ml/管）1  管（0.2ml/管）1  管（0.5ml/管）

底物 A 液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

底物 B 液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

终止液1  瓶（8ml/瓶）1  瓶（15ml/瓶）1  瓶（30ml/瓶）

说明书1  份1  份1  份

板贴3   张6   张15   张

操作步骤与判定

1.操作步骤

1. 1 试剂准备：20X 洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释成 1X 洗涤液（即 1 份 20X 洗涤液加入 19 份蒸馏水）。

1.2 实验准备：取出包被板，记录好样本的位置。如需使用部分板条，则将需要的板条拆下进行实验，将剩余的板条置于 2-8℃干

燥保存。

1.3 加样/对照：分别将 20µl 待检样品和阴、阳性对照加入到抗原包被板孔内，其中阴、阳性对照各加 2 孔；注意每个样品使用不 同的吸头。

1.4 加酶：每孔加入 80ul 酶标抗体 ，轻轻振荡混匀 ，封板后置于 37℃温育 30 分钟。

1.5 洗涤：弃去孔内液体 ，每孔加入 300µl 1X 洗涤液 ，洗涤 4 次 ，在最-后一次 1X 洗涤液弃去后 ，将孔中残留的 1X 洗涤液拍干。

1.6 显色：每孔先加入 50µl 底物 A 液 ，再加入 50µl 底物 B 液 ，轻轻振荡混匀 ，封板后置于 37℃温育 15 分钟。

1.7 终止：每孔加入 50µl 终止液 ，轻轻振荡混匀 ，测定 OD450nm波长处各孔的吸光值。

2.判定

2. 1 实验成立条件 ：阴性对照 OD450nm 平均值-阳性对照 OD450nm 平均值≥0.3。

如果实验结果不成立 ，有可能是实验操作失误造成的 ，应按操作步骤进行重复实验。

2.2 S/N 值=    阴性对照 OD450nm 均(待测样品 OD450nm 值)值    

2.3 结果判定 ：S/N 值≥0.3 ，判为阴性； S/N 值＜0.3 ，判为阳性。

3.注意事项

3. 1 试剂盒严禁冻结 ，试剂盒从 2-8℃冰箱中取出后需室温放置 30 分钟以上 ，完-全恢复至室温方可使用 ，使用后应立即密封放置

2-8℃保存。

3.2 使用前需确认试剂盒有效期 ，应在有效期内使用。

3.3 所有试剂严禁接触皮肤和粘膜 ，检测结束后所用耗材按国家规定进行无害化处理。

3.4 底物 B 溶液变蓝，则不能使用。

3.5 每个血清样品 1 个吸头 ，避免交叉污染。

3.6 待检血清样品数量较多时 ，应尽量缩短加样时间。

3.7 终止反应后立即用酶标仪读数，应在 10 分钟内完成。

3.8 所有样品、洗涤液和各种废弃物都应灭活处理。

3.9 严格按照实验操作步骤操作。

3. 10 仅用于科研或遵守当地法律法规。

规格

1*96T/盒 ，2*96T/盒 ，5*96T/盒

贮藏条件及有效期

2～8℃保存 ，有效期为 12 个月。