赛默飞一维色谱方法和在线SPE方法 对原料糖中2-氨基乙酰苯的测定
采购指南2022/7/28 21:18:02
液相色谱仪是这么工作的，原来也不复杂
来源：化工仪器网2022/7/1 9:10:19415
导读:
液相色谱仪是一种常用的色谱仪产品，主要由储液器、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，被广泛用于多个领域中。
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有高效、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。
工作原理：
分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数，离子交换色谱法为选择性系数 （或称交换系数），凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。
在检测生物物质如血浆或血清等积累在反相色谱柱上，必须采用不同与其他物质的清洗方法。大部分情况下，纯有机溶剂如乙晴或甲醇不溶解多肽和蛋白质，因此不能有效地清洗柱子。反而，有机溶剂和缓冲液、酸、离子对试剂等的混合物则能有效地溶解。为确保液相色谱柱再生的效果，建议在使用溶剂冲洗色谱柱之前，了解色谱柱的填料类型以及确保使用的溶剂能与柱子的填料相容。硅胶基质的柱子通常来说都是相容的，但有机聚合物基质的柱子可能会在某些溶剂组合中膨胀或收缩，这样会影响色谱柱的柱效。
在使用溶剂清洗反相色谱柱时，须对每个溶剂系统至少要冲洗20体积。由于有些溶剂系统黏性很大，冲洗的流速应该相应调整以确保不会超过泵压。当检测的是尿液等样品溶液时，至少应该用40～50体积的HPLC级水来冲洗柱子。
液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
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