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引言 
注射液是一种治疗低磷酸血症的药物，临床上常用作心肌 缺血辅助治疗药。低磷酸血症可在急性情况，如输血、体外循环下进行手术 和胃肠外营养时出现，也与一些慢性疾病，如慢性酒精中毒、营养不 良、慢性呼吸衰竭中碳酸耗竭有关[1]。注射液在临床中的应用很 广泛，但由于其本身的结构特点，的测定多采用衍生后紫外分 光光度法；同时在的生产过程中可能会引入杂质，其有关物质 有磷酸果糖、磷酸葡萄糖和果糖等，这几种杂质都是强极性化合物，而且含 量很低，在普通反相色谱和示差检测器中无法检测。有文献报道采用纸电泳 法分离苯二胺显色后检测的方法，以及薄层色谱法检测[2-4]，也有文献采 用固体复合酶法测定的含量[5]。这几种方法不仅操作繁琐，且重 复性和灵敏度存在问题。
本实验采用戴安离子色谱脉冲安培法分离测定和3种有关物质， 分离度好，灵敏度高，操作简便。建立了一种有效检测及其有 关物质的方法。

测试条件
仪器：戴安ICS-5000离子色谱仪（Thermofisher公司），配四 元梯度泵，ED安培检测器，AS-AP自动进样器 色谱柱：CarboPac PA 20保护柱6.0 µm, 50×3 mm，（ P/N: 060144） CarboPac PA 20分离柱6.0 µm, 150×3 mm，（ P/N: 060142） 柱温：30 ℃； 淋洗液：NaOH/ NaOAc梯度淋洗 流速：0.4 mL/min； 定量环：20 µL； 
检测方式：脉冲积分安培检测（四电位波形）

样品前处理
样品稀释适当倍数后，经过0.22 µm尼龙滤膜过滤， 取续滤液直接上机分析。
 

结果和讨论
色谱柱的选择及淋洗液梯度条件优化
的结构中含有两个磷酸基团，可以采用 阴离子交换色谱法对其进行分离。同时其有关物质为 磷酸果糖、磷酸葡萄糖和果糖，这些结构中均含有羟基， 能够在安培检测器上有信号。为了保证色谱峰的分离度和 保留时间的合理性，我们选择CarboPac PA 20的糖柱和 NaOH/NaOAc梯度淋洗的方式。 在上述色谱条件下几种 物质的色谱图如下图（图1）。

重现性、线性和灵敏度
吸取果糖、磷酸葡萄糖、磷酸果糖和果糖二磷酸质 量浓度为1.0 mg/L的混合标准溶液，重复进样10次，记 录色谱图，它们保留时间的相对标准偏差分别为0.41%、 0.57%、0.53%，峰面积的相对标准偏差分别为1.60%、 1.14%、1.46%，峰高的相对标准偏差分别为0.54%、 0.64%、0.62%，重现性较好。
将标准品定量混合并将标准品溶液稀释得到一浓度 系列，对上述系列浓度各测定3次后, 取其峰面积的平均 值，以峰面积为纵坐标，标准液质量浓度为横坐标建立标 准工作曲线，各种物质的线性范围如表1, 相关系数都在 0.9997～0.9998之间。以信噪比（S/N）为3计算检出限， 果糖、磷酸葡萄糖、磷酸果糖和果糖二磷酸的检出限依次 为0.010、0.010、0.020和0.10 mg/L。

实际样品分析
市售注射液，稀释后经过0.22 µm滤膜 过滤，按选定的色谱条件进行测定，外标法定量，其谱 图见图2，分析结果见表2。 

结论 
离子色谱分离脉冲安培检测器测定及 其有关物质果糖、磷酸葡萄糖和磷酸果糖的方法操作简 便，重复性好，线性范围内相关性好，准确度高。同时 果糖二磷酸和三种有关物质相比灵敏度较低，在进行含 量测定时，无需较大稀释倍数，可以减小由于稀释倍数 过大引入的误差。该方法可同时进行含量测定和有关物 质分析，具有较高的实用价值。