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前言 ：稳定、可控的生物兼容性载药系统非常重要，并对药物和疫苗给药系统有显著影 响[1, 2]。寻找创新和改进的新方法来制备载药系统，可以避免使用生物兼容性较低的 材料，并提供更稳定的载体以及更容易的制备途径[3]。

壳聚糖是一种存在于甲壳类生物（例如螃蟹和龙虾）壳中的多糖。因具有高度稳定 的化学活性、生物兼容性和控释能力而得到广泛研究[1, 4, 5]，本研究也选择它作为研究 对象。壳聚糖溶于弱酸性水性溶剂，可通过共价或离子交联形成各种尺寸和形状的 水凝胶装置。聚磷酸盐常用于制备壳聚糖纳米和微米颗粒。本文中，我们研究了一 种新型聚磷酸盐（八磷酸四苯基卟啉 (OPP)）诱导壳聚糖水凝胶化，它是一种光活性 生色分子，可用作壳聚糖交联剂（图 1）。壳聚糖与 OPP 交联，自组装成 OPP 生色团。该机制导致光谱变化，并可使用紫外-可见光谱法来监测 这一变化。

阴离子形式的 OPP 膦酸基团（图 1）与壳聚糖的质子化胺发 生强烈相互作用，使溶液中的聚合物链发生交联。这个过程可 形成直径约 1 µm 的颗粒，能够包埋各种生物活性化合物（例 如疫苗抗原或药物）。

本研究中，我们使用 Agilent Cary 3500 紫外-可见分光光度计 对 OPP-壳聚糖的交联机理进行了监测与研究。Cary 3500 能 够通过软件来控制样品池中的搅拌，并且对环境光不敏感，因 此特别适合此项研究。其光不敏感性可实现按顺序添加试剂， 而不会影响基于时间的测量数据。通过原位合成，大程度减少了操作步骤。

实验部分：壳聚糖-FITC-OPP 水凝胶微粒的制备与监测 本实验使用了异硫氰酸盐荧光素 (FITC) 标记的壳聚糖的 1% 乙酸溶液。按照以下步骤将壳聚糖溶液逐步加入固定体积的 OPP 溶液中制备样品： 1. 将 2 mL 0.125 mg/mL 的 OPP（pH 值约为 7）加入装有星 形 PTFE 磁力搅拌子的 3.5 mL 石英样品池中2. 将装有水的样品池放在参比通道中作为对照 3. 然后使用 1 mol/L 盐酸 (HCl) 将 OPP 溶液的 pH 调至 4.5，以匹配壳聚糖溶液的 pH。这确保了交联过程中观察 到的变化与 pH 值的变化无关 4. 平衡 20 秒后进行波长扫描 5. 根据表 1 少量添加一系列 2% w/v 壳聚糖-FITC。每次添加 后平衡 20 秒，然后进行波长扫描 6. 完成壳聚糖-FITC 添加后，加入 1 mol/L 氢氧化钠 (NaOH) 使 pH 值恢复为 7。再次平衡 20 秒后进行波长扫描

结论：使用 Cary 3500 双池紫外-可见分光光度计对新型生物聚合物 载药系统（壳聚糖-FITC-OPP 水凝胶微粒）的合成进行了监 测。Cary 3500 具有软件控制的搅拌功能，可直接将溶液添加 到样品池中进行合成。通过波长扫描对合成进行持续监测，可 以确定纯交联剂的吸收峰何时从 417 nm 移至 425 nm。峰位 移表明已发生交联，水凝胶微粒已经形成。