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液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196 ℃的液态氮，或在-150 ℃的氮气中的保藏方法，它的原理是利用微生物在-130 ℃以下新陈代谢趋于停止而有效地保藏微生物。液氮罐厂家介绍其操作步骤如下：

1、安瓿管或冻存管的准备

用圆底硼硅玻璃制品的安瓿管，或螺旋口的塑料冻存管。注意玻璃管不能有裂纹。将冻存管或安瓿管清洗干净，121 ℃下高压灭菌(15～20) min，备用。

2、保护剂的准备

保护剂种类要根据微生物类别选择。配制保护剂时，应注意其浓度，一般采用10 %～20 %甘油。

液氮超低温保藏技术简介

3、微生物保藏物的准备(如何为微生物保藏物做准备?)

4、预冻(如何为物质做预冻处理?)

5、保藏

将安瓿管或塑料冻存管置于液氮罐中保藏。一般气相中温度为-150 ℃，液相中温度为-196℃。

6、复苏方法

液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置在38 ℃～40 ℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止，一般约需50 s～100 s。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基上进行培养。

后，通过操作，根据自身实验体会，比较几种菌种保藏方法的利弊，做出终的答案。特别提醒大家在操作时一定要注重自身安全，做好防护措施。